抗体纯化
制备高特异性、高效价的抗体是实验免疫学技术的基础,抗体质量的高低将直接影响试验的成败。
多克隆血清中含有复杂多样的抗体,它不仅含有针对免疫原产生的抗体,还有血清的全部抗体,此外还含有许多自身的血清蛋白。
为了获得成分相对单一的抗体或将抗体用于特定的用途,就需要对抗体进行纯化处理。
纯化抗体的用途之一是降低非特异性本底,能去除引起实验误差的污染蛋白,且能控制实验中产生阳性信号的抗体量, 因此纯化抗体可以作为所有免疫化学实验中降低本底的基本手段。
另外,使用纯化抗体还能进行抗体标记(减少有时使用标记二抗带来的干扰),或用于制备免疫亲和纯化柱等。
抗体纯化的方法包括DEAE离子交换色谱法、硫酸铵沉淀法及其他方法,其中蛋白G或蛋白A亲和柱法纯化较为简单、高效,抗原亲和柱法纯化则能获得针对抗原的特异性抗体。
我公司拥有的抗体技术服务团队,可为客户提供多种抗体纯化服务,如硫酸铵纯化、ProteinA/G纯化、抗原亲和纯化等,帮助客户解决各种抗体纯化问题。
抗体纯化(ProteinA/G法)
服务编号:YKSO-002
服务内容:
1.Protein A/G 纯化(≤50ml)
2.紫外吸收法测定抗体浓度
3.纯化抗体Elisa
最终交付的材料:
纯化后抗体;SDS-PAGE抗体纯度鉴定报告;ELISA检测报告;完整实验报告。
样品要求:
抗血清,0.2mg 抗原
注:
1. 蛋白A或蛋白G是细菌胞壁蛋白,它们能结合抗体Fc段,这一结合非常牢固,但其亲和力对pH的变化敏感,抗体/蛋白A或蛋白G的亲和力随PH值的降低而急剧降低,因而可用于纯化不同来源的抗体和抗体亚型。
2. 在抗血清中免疫球蛋白IgG的含量为8-12 mg/ml,只占血清中总蛋白含量的10%左右。
蛋白A/G纯化抗体的得率大约为5-10 mg总IgG/ml抗血清;